作者ray289 (HAPPINESS...)
看板Biotech
标题Re: [求救] vectorNTI中的M.EcoBI酵素
时间Tue May 24 15:08:15 2011
※ 引述《leoblack (朋友看太重的猫)》之铭言：
: 如题
: 用vectorNTI搜寻到M.EcoBI这个可以用的cutting site
: 目前也只有这个cutting site可以用
: 但我遇到了2个问题
: 1.虽然vectorNTI中说M这个意思是指methylation
是的，它是指Methylation的意思
: 这意思是指M.EcoBI这酵素只切有methylation的片段嘛?
不是，M.EcoBI它并不为一个具有cutting function的酵素
相对地它是一种Methyltransferase，可以把甲基由A物质转移到B物质上头
而这儿的B物质是dsDNA或你用的Plasmid
A在in vivo中的话，可以是S-adenosylmethionine (AdoMet)等
: vectorNTI中标记着这酵素是methylation at 3 (6mA)--->其实我看不懂~<囧>
应该是指M.EcoBI会专一性的recognize到5'-TGAN8TGCT-3'
并於第三个位置上做甲基化 产生6-methylaminopurine (m6A)
如此可以保护这个site不被EcoBI或其他可认到相似site的酵素所切
Ref.
http://www.uniprot.org/uniprot/P06990
http://www.people.vcu.edu/~elhaij/lab/articles/NAR2001.PDF
: 2.我似乎在NEB等网站里~找不到这个酵素
: 请问我可以去哪里订购这只酵素呢?
: 感谢
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◆ From: 211.76.175.171
1F：推 leoblack:感谢~ 05/24 15:20