作者md183 (十月的兔子)
看板Biotech
标题[求救] NO assay 制备是否出了甚麽差错
时间Thu Apr 28 09:55:34 2011
大家好
最近要做NO assay，然後自己配Griess reagent
配方是以下
0.1% N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride (NED) in water
1% sulfanilamide in 2% phosphoric acid
然後这是我的步骤，请大家帮我看看这样可以吗?
如果全部想要配成20mL
那请问是
1. 先配2% phosphoric acid
取400μl phosphoric acid + 19600μl
2. 再加入0.2g 的1% sulfanilamide
3. 再加入 0.02 g 0.1% N-1-napthylethylenediamine dihydrochloride
Standard 的浓度是0, 5,10, 25, 50, 100uM
NaNO2分子量=69
那我配100 uM方式
x/69=0.1M x 0.01
x=0.069 g 0.069g + 10mL 是0.1M
再取10 ul +9990 ul
即为100 uM
请问是吗?
不好意思麻烦大家
我网路上看了许多protocol，可是实际操作吸光值却呈现不出来
想说是配药的过程有甚麽差错吗?还是有可能是药放太久?
(化学药剂至少两年了，而且是都分装到50mL离心管中)
这里先跟大家说谢谢了
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每个人都把希望寄托在未来，
却忘了未来是由每个现在所组成。
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◆ From: 140.128.143.163
1F：推 aurth:印象反应完是红色..要用不含phenol red的medium做实验 04/28 16:05
2F：→ aurth:然後Griess混合後有时效性需要马上使用 04/28 16:06