作者waitingu (Phil-Ku)
看板Biotech
标题[讨论] 该如何让细胞的讯息传递位於low level~
时间Tue Apr 12 17:38:28 2011
最近在做讯息传递方面的实验
希望能在加入FBS後看到细胞内RTK磷酸化程度增加，以及下游的讯息传递路径有
Time-course的变化
一开始的流程大概是先将细胞放在FBS free的medium中 O/N
之後加入FBS，再计算时间收取蛋白跑WB
但却很奇怪的发现，一直维持在FBS free的那组细胞，其RTK磷酸化程度比加入FBS後
30 mins、1 hour还高，重复几次都是这样
而其下游的讯息传递蛋白，例如Src、Akt等也都有类似的现象
因此想请问各位版友，有没有过类似的情况呢？
如果需要看induce起来的现象，该如何让细胞的讯息传递处於low level的状态？
(看来用FBS free的medium似乎不是正解)
当然starvation与signal transduction不是同一件事情，但这实在是让我百思不得其解
感谢大家的意见与讨论^^
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◆ From: 140.112.121.97
1F：推 icome:是什麽细胞? 有些细胞会受hormone刺激 要用charcoal-treated 04/13 17:19
2F：→ icome:的medium和FBS 例如乳癌和摄护腺细胞 04/13 17:20
3F：→ waitingu:目前是用HEK293细胞 04/14 16:05
4F：→ icome:=.= 那就不清楚了 可能是细胞有问题? 建议用低代数的细胞 04/17 10:55
5F：→ waitingu:感谢楼上 已经重新解冻stable clone 希望能有好结果XDD 04/19 12:17