除了以上大大补充的 我觉得以PCR产物纯化来说 若只是 "酒精沉淀" 的确是单纯用来去除 PCR buffer 等盐类环境 但以上有偷懒的成分在 XD 通常还是会跑个胶...切胶来做纯化 好处有两个 1.去除杂 band 2.去除template 第二点我个人认为是满重要的 只要一点点量的 intact plasmid 就很大机会被直接 transform 也就容易挑到自接 至於为什麽 ligation 产物不纯化 通常 final 接的环境会控制在 10~15 ul 左右 (听说体积越高碰撞机率越低这样) 这种体积做纯化技术不好东西很容易就被纯丢了 没有必要冒这个风险... 而且做得好的话不用取太多去 transform 也 ok 如果是用电的方法送入 取太多去送的话 嗯...会电爆 基本上盐浓度真正有影响是在这个地方 结论是 反正还有 heat shock ...XDDD ※ 引述《smilegirl24 (susu)》之铭言： : 最近在上生物技术的实验课 : 从PCR→DNA purification→enzyme cutting→DNA ligation→transformation : 目前学到这里 : 觉得很好奇 从PCR到限制酵素切割 需要经过DNA纯化 : 原因是因为要让从PCR的环境 : 转变成适合限制酵素切割的环境 : 故要经过DNA纯化 : (这样说有错吗?) : 那为什麽在做transformation之前没有做纯化的步骤呢? : 利用ligation後未纯化的mixed DNA不会影响後面要计算的转殖效率吗? : 若将plate放太久，是什麽原因造成卫星现象? : 我是初学者 很多都不懂 请大家帮我解答一下!! : 感激不尽 > < --

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