※ 引述《boblu (六百)》之铭言： : ※ 引述《smilegirl24 (susu)》之铭言： : : 最近在上生物技术的实验课 : : 从PCR→DNA purification→enzyme cutting→DNA ligation→transformation : : 目前学到这里 : : 觉得很好奇 从PCR到限制酵素切割 需要经过DNA纯化 : : 原因是因为要让从PCR的环境 : : 转变成适合限制酵素切割的环境 : : 故要经过DNA纯化 : : (这样说有错吗?) : 基本正确 pcr可能有multiple band 一般都是要跑胶再切出来 个人倒觉得restriction buffer的盐浓度很高 pcr产物如果乾净够浓 直接切也无妨吧 : : 那为什麽在做transformation之前没有做纯化的步骤呢? : : 利用ligation後未纯化的mixed DNA不会影响後面要计算的转殖效率吗? : 就单纯取用的 plasmid 溶液体积 和菌液相比甚小 所以就不管了 : 且ligation 一次用的 DNA 量也很低 再重新纯化又有损失 : : 若将plate放太久，是什麽原因造成卫星现象? : 有吃到抗药性 plasmid 的那只菌长出的菌落会慢慢把周围的抗生素都分解掉 : 然後没有吃到抗药基因的菌就也可以快快乐乐的生长了 所谓狐假虎威就是这个意思 -- 人好 欠表 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 110.174.79.41