作者mayhuahappy (May)
看板Biotech
标题[求救] 树脂纯化产生褐色沉淀 ?
时间Sun Mar 27 01:37:22 2011
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近在做的一项实验是想利用质体上含有的chitin binding doman
加入DTT切除後希望在PAGE上能够看见我的质体片段
由於我的片段上有His,老师要我用树脂来纯化,但在ELUTE的部分换成含有DTT的buffer
一般我的纯化步骤则是：
DI→0.1M Ni→DI→starting buffer→破菌後的菌液
→starting buffer→Elute→DI→EDTA→DI
但是发现把Elute改成DTT的buffer加入後树脂马上变成褐色,
老师说是我在第二次的Starting buffer後要用DI再把imidazole洗乾净
实在很想知道问题到底出在哪边!!!???
不好意思我是分生新手~麻烦各位为我解答一下>"<
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◆ From: 118.160.149.60
1F：→ qumai:有点看不懂你的实验耶 质体片段是指蛋白质吗 03/27 16:06