作者waterfrog302 (WF)
看板Biotech
标题[求救] Ficoll分离脐带血後结块
时间Fri Mar 25 23:18:38 2011
各位学长姐好
小弟最近两个月遇到一个很麻烦的问题
我是用Ficoll-paque将脐带血分层(血:PBS = 1:4)
取雾雾的Mononucler层後
离心清洗(200g 10min)两三次後(50ml离心管)
收集成一管(15ml离心管)
但最近发现在离心第二次後
细胞的pellet很难打散
都会黏起来，很像脂肪组织...
到最後要收集成一管，离完心会有一半的pellet打不散....
最惨的是
在ficoll部份做完，染完MACS的磁珠抗体
收下来的CD34+细胞竟然放一下也会自动结块 囧
这导致我能从脐带血收割到干细胞的收割率只有20%...
而且细胞数都顶多刚刚好让我种重要条件
更可怕的是还不知道这样的细胞养不养的起来 囧
(第一次出现这种情形时是养不起来的...)
想请问有经验的前辈
问题到底出在哪里呢 orz...
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标题 [新闻] 兄弟愈战愈勇 最快周五点灯「M10」
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