作者rickkao11 (rickkao11)
看板Biotech
标题[求救] ligation 的正接反接
时间Wed Mar 23 17:44:19 2011
请问一下大家ligation 的问题
我的insert用EcoR1切一刀，vector也是一样处理
在ligation时,有可能出现正接会反接的情况
後来进行transformation，是不是会出现同一个E.coli中同时有正接和反接的plasmid ?
请问大家要如何处理这个问题
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.121.97
1F：→ luke12182006:想了一下...这个问题应该不存在 03/23 17:54
请问为什麽呢？
※ 编辑: rickkao11 来自: 140.112.121.97 (03/23 17:57)
2F：→ williamyang:若是这情形的话,那大家都不用挑single colony了 03/23 19:29
3F：→ yaprint:colony是来自同一颗菌增殖的吧 03/23 19:50
4F：→ rickkao11:谢谢您的回答 03/23 21:00
5F：→ chvkimo:我怎麽觉得这样回答怪怪的, 我认为要问的问题应该是=> 03/24 00:44
6F：→ chvkimo:为什麽 一只菌只会有一种 plasmid存在 ,不过刚看下面有回 03/24 00:45
7F：→ chvkimo:文了, 至於最终原因我也不太清楚~ 03/24 00:46
8F：推 Ianthegood:不然就想办法切两刀呗 03/24 16:50
9F：→ ganbaol:始终觉得单一切位很难接,容易自接,因为我讨厌加cip :( 03/24 18:54
10F：→ skyken10:请问楼上G大~为啥不喜欢Cip呀~单纯好奇~^^ 03/25 11:24
11F：推 yaliu:我也讨厌加CIP~~麻烦然後有时後会CIP不完全～感觉CIP这一步 03/25 12:21
12F：→ yaliu:好抽象阿～～ 03/25 12:22
13F：→ soom:怕不完全的话可以多加几次CIP做久一点 03/25 15:35
14F：→ ganbaol:CIP会把我的DNA.....吃掉.....曾经发生过的囧事.... 03/25 21:27
15F：→ ganbaol:而且多做一步纯化.感觉内容物会越复杂? 只是感觉的问题... 03/25 21:29