作者hchung (hiflypig)
看板Biotech
标题Re: [求救] 骨头切片antigen retrivel的方法
时间Sun Mar 13 00:59:37 2011
※ 引述《DouglasT (sdf)》之铭言:
: 我也做过一些bone section immunostain,
: 我也碰过你的问题,而且残存的section 就算有染上,也不能照相。
: 我没真的测试过,但我觉得很多CD marker 对福马林类的fix 都很不耐,
: 就算antigen retrieval 没掉片也染不出来。
: 我後来用frozen section,同时参考别的paper 用胶带法,掉片的问题就解决了。
: 同时我也不用福马林类做fix ,是采用fresh bone secton,
: 在染之前用EtOH 或Acetone 短暂fix ,很多染不出来的CD marker 都活回来了,
: 不是CD marker 的antigen 他们的intensity 也会变强,
: 效果显着。
: 你可以参考一下。
又多了一个人来讨论这个困扰人的问题了~XD
进入主题!!
想请问你是观察骨头的哪个部份呢?
我之前有尝试过frozen section,就是用OCT包埋切片,不过这样的方法,会发现
我要观察的细胞,osteoblast跟osteoclast都脱离我的骨头表面,就是会漂到
bone marrow 中间,如果这样以形态来说,就会变的没有说服力,後来我们才用
paraffin section。
另外想请问你,使用fresh bone section的话,是直接将骨头取下,不灌流固定,
直接切片,那这样的话刀片不就要用钢刀之类的刀片。>""<
还有就是胶带法~第一次听到这样的方法,可以跟我说一下这是什麽方法吗?
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