最近在做 cytochrome P450 的酵素实验 之前我提供能量的方法是直接给予 NADPH 但是有很多文献都是给予 NADPH generation system (NADP+ G-6-P G-6-P dehydrogenase) 现在问题就是，我利用NADPH为能量作酵素活性测定没有反应 而老师希望我改用 这个 system 试看看，可是我又怕并不是这里的问题 我把我的实验流程写一下 1. 萃取 microsomal fraction (利用超高速离心取沉淀，利用buffer冲散) 2. 90 ul protein(1mg/ml ~ 3mg/ml) + 100 ul 含 2 mM p-nitroanisole (受质)的buffer 3. 加入 10 ul 10 mM NADPH 後放到 30度 的环境下 反应 30分钟 4. 测吸光植 不知道有这方面经验的学长，能否给予一些意见 因为酵素似乎都没跟受质反应.... --

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