作者owl628 (owl628)
看板Biotech
标题[求救] 4% paraformaldehyde的作用???
时间Sun Jan 23 14:50:49 2011
这阵子第一次试着做免疫染色
利用4% paraformaldehyde进行固定约15~20分钟
结果在显微镜下看到固定後细胞都变成圆圆小小的
(细胞原本是fibroblast)
问了一下同学他们说paraformaldehyde也会有打洞的效果
但是我查了他都是固定而已,打洞是後面步骤的另一个东西
不知道有没有人知道为什麽???
麻烦知道的人可以说明一下,拜托大家了~,谢谢^^
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.168.102.173
1F：→ ad1980:看 paraformaldehyde 的品质吧~ 纯的只有固定效果 01/23 15:49
2F：→ ad1980:我老板不久前才要实验室换纯的，说之前用的不够纯，混有 01/23 15:51
3F：→ ad1980:MeOH 会打洞，影响到看 glycoprotein。 01/23 15:52
4F：推 oplz:fixation 跟 perm 是不一样的东西.. FA/PFA 跟 MeOH 作用原理 01/23 17:39
5F：→ oplz:也不同.. 01/23 17:39
6F：推 leoblack:1.PFA是fix不是打洞 2.打洞跟细胞变得小圆的没直接关系 01/23 23:14
7F：推 dragonjaff:可能天气太冷 细胞缩起来了? 先把PFA回温到25度再做吧 01/23 23:21
8F：→ owl628:谢谢大家的意见~,我的PFA是现配的,所以应该不会太冰之类的 01/24 16:44
9F：→ owl628:学长说是PFA会让细胞脱水的原因???才会让细胞变小 01/24 16:45
10F：推 fjubiology:PFA in 37 degree C PBS(3.7~4% PFA) 01/24 19:59
11F：→ fjubiology:FIX at 37 degree C for 15 min 01/24 20:01