作者kshsdeck (..............)
看板Biotech
标题Re: [求救] 专一性较高的Nickel resin??
时间Sat Dec 25 16:57:43 2010
※ 引述《nymph ()》之铭言：
: 请问大家
: 目前我是使用QIAGEN的Ni-NTA Resin
: 但是专一性不是很好 总是会抓到其他杂band
: 听说resin的专一性是和nickel的带电量有关
: QIAGEN是带4个正电 所以专一性比较差
: 请问有其他品牌的比较好用吗??
: 谢谢各位!!
可以换Clontech的TALON,它用的是Co,
Co对His的亲和力比较低,所以杂蛋白量也会低,
但你纯化过程中,buffer中的imidazole浓度也要降低,
一般Ni column常可以用到20-30mM的Imidazole去wash,
但用30mM的Imidazole去wash TALON,可能很多target蛋白就都被洗下来了,
另外还有一点,用TALON,你的buffer中不能有DTT和EDTA
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 111.184.43.35
1F：推 qumai:XD 推 TALON 我们现在也改用这个了 12/25 17:44
2F：推 nymph:谢谢你的回答!! 12/26 21:00