作者luke12182006 (悠哉的风)
看板Biotech
标题Re: [问题]蛋白质的电泳
时间Sun Nov 21 18:23:08 2010
※ 引述《tryitnew (ken)》之铭言：
: 请问蛋白质电泳时，pH为什麽会有梯度的现象
: ，而不是均一的pH值呢？要如何决定蛋白质从
: 正极开始跑，还是负极呢？分离之後的蛋白质
: 要怎麽取出啊？
: 如果在蛋白质上染色，就可以用萤光来确定分离
: 出的蛋白质的量了吗？文献好像提到要用萤光强
: 度(fluoresence intensity)normalize
: 这是我看论文想到的问题，小弟不才，请各位大大
: 帮忙解惑。
你说的蛋白质电泳是指2D-PAGE吗?
如果是的话，在跑1D的时候是依PI来分离蛋白质，我们也称为IEF
每个蛋白质或多或少都有带正电或负电，PI指的是蛋白质等电点为零时的PH值
跑完1D後，2D就依据MW大小来分离
我们会把跑完1D的胶条泡Equilibrtion buffer，
同时使它附上SDS(阴离子团，就是负电啦~)
所以我们都是从负电往正电跑喔~
取出就更简单啦!有钱的和没钱的XDD
有钱的-->机器手臂，没钱的-->tip头剪一剪，扣下去在吐出来就好了=ˇ=
我记得蛋白质定量不是靠萤光强度耶...
没关系板上还有很多大大可以帮你解决问题XDDD
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