作者luke12182006 (悠哉的风)
看板Biotech
标题[求救] RNA萃取
时间Sat Nov 20 12:47:45 2010
我是用Kit去抽RNA，我直接跳到问题部分...
最後一步萃取时没换tube，结果我的RNA跟水和酒精就很融洽的混在一起了...
我想问的是有没有办法去除酒精而不让RNA降解掉
或是去除水而让RNA沉淀的方法，当然同样要避免RNA降解或变性
请板上各位先进大大帮帮忙噜~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.194.204.47
1F：→ blence:如果你的RNA跟水和酒精会融洽的混在一起,那前一个步骤过酒 11/20 14:44
2F：→ blence:精时,就已经一起被冲下来了 11/20 14:45
3F：推 CHOW:试试酒精沉淀後重新回溶? 11/20 19:27
4F：→ luke12182006:是混到旧tube中的酒精(之前wash buffer含的) 11/20 21:52
5F：→ luke12182006:怎麽酒精沉淀?大家就已经和乐融融的在一起了@@" 11/20 21:54
6F：推 leoblack:和乐融融在一起?!你不知道RNA不溶於酒精嘛!?怎麽和乐融融 11/20 23:13
7F：→ spirithorse:把那堆东西加isoprepanol重新沉淀噜~ 11/20 23:14
8F：→ luke12182006:虽然RNA不溶於酒精，但溶於水啊，酒精是极性溶剂和水 11/21 00:07
9F：→ luke12182006:溶在一起是很合理的 11/21 00:07
10F：→ luke12182006:异丙醇溶水和酒精，虽不溶RNA，但同样没法拉出RNA 11/21 00:13
11F：→ luke12182006:就是因为有水QQ 11/21 00:13
12F：→ luke12182006:甲苯虽可以溶酒精不溶水，但是会使RNA降解... 11/21 00:16
13F：→ blence:上述都不是问题,你缺乏一般RNA extraction protoc操作经验 11/21 01:26
14F：→ Ianthegood:请wiki ethanol precipitation 11/21 01:27
15F：推 yaliu:的确是用绝对酒精或者异丙醇可以沈淀核酸喔 11/21 01:39
16F：→ yaliu:异丙醇之前学到的要加等体积，绝对酒精是用2倍体积或者加点 11/21 01:41
17F：→ yaliu:高浓度盐，可以参考molecular cloning~~详细原理其实我也不 11/21 01:42
18F：→ yaliu:太了解.... 11/21 01:42
19F：→ yaliu:之前有同学抓RNA有用isopropanol 4度抓O.N.的，据说抓下来浓 11/21 01:43
20F：→ yaliu:度高，但是断的也比较多...我想你还是重萃好了，RNA不好保存 11/21 01:44
21F：推 yaliu:回头看了一下，有点不太懂，你的例子解决不就是再过一次 11/21 01:46
22F：→ yaliu:column就好了？？只是可能回收率不高，RNA浓度低而已？ 11/21 01:47
23F：推 spirithorse:请问那用phenolchloroform呢?? 11/21 11:48
24F：推 lulusa:Y大是正确的 请加入2X体积绝对酒精和1/10X的3M NaCl 11/23 22:05
25F：→ luke12182006:谢谢啦~ 11/25 21:34