作者sabayal (polar bear)
看板Biotech
标题[求救] renilla冷光测不到
时间Tue Oct 19 15:42:33 2010
实验是以pGL3接要测定的Promoter作为test reporter
pRL-TK 作为internal control，双冷光系统进行
plasmid比例pGL3:pRL-TK = 10:1(2ug:0.2ug)/well 在12well盘
transfection4~6小时，换有10%FBS的DMEM，培养24小时後
用promega公司的Dual-Glo luciferase assay syste分别侦测冷光值
问题来了
firefly luciferase的值有破万
renilla luciferase的值跟背景值差不多(没有破百)
也单独转pRL-TK vector进hela cell做测试，结果还是一样
想请问有相关经验的各位
有可能问题出在哪？
或是有含renilla基因的plasmid近期测试working正常，可以分一点给我吗?
感激不尽。<(_ _)>
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.60.122.10
※ 编辑: sabayal 来自: 210.60.122.10 (10/19 15:46)
1F：推 kaifish:建议您定序或以限制酶检查一下plasmid是否正确 10/19 16:20
2F：推 yuyao:请问你有Stop&Glo续加在LARII里吗? 这两剂不能分开 10/19 20:38
3F：→ yuyao:promega这支产品的特性是要加在一起的 10/19 20:39