作者goodfish700 (好鱼)
看板Biotech
标题[方法] 免疫染色抗体可用稀释倍率范围？
时间Sun Sep 26 18:21:17 2010
大家好
敝人在做免疫染色时
用的是 Santa Cruz 的抗体
Santa Cruz 说明书上说
这支抗体在免疫染色可用的稀释范围
是 1:50 - 1:500
而建议起始稀释由 1:50 开始测试
於是我遵照说明书的去做
测试结果似乎是不错而且有染到目标物（神经细胞核）
但因为 1:50 实在太耗抗体
而且有 paper 作者告诉我说
他用同一支货号抗体，1:1000 稀释也染出来
於是老板就叫我用同一批组织
下次测试 1:250 和 1:1000 的结果
如果较高稀释倍率可以做出同样水准结果的话，以後就可以这样做
然後他要我告诉他，免疫染色定量
该用什麽方法判别 1:50 、 1:250 、 1:1000 之间染出来效果的差异
我想得到的只有去数细胞核数目
还有计算特定区域面积下的细胞核密度
请问有没有这方面的前辈可以告诉我贵实验室用的方法
或是介绍一些连结我可以参考的
还是就真的只是这两种？
我老板强调要 scientific ，不过我觉得不懂他 scientific 的标准在哪
如果他早就知道这种定量的方法，就不会要我去找给他了
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◆ From: 220.132.126.121
1F：→ kotenka:一般就是有染上的细胞比例(%)、讯号强度(用软体计算)还有 09/27 00:32
2F：→ kotenka:看cellular localization有没有改变吧 09/27 00:32
3F：推 spirithorse:我的一抗都是1:200,二抗1:100(不能再多了!) 09/27 00:48
4F：推 reinherd:太浓会导致background signal太高 不是越浓越好 09/27 06:59