作者FinAPP (暮然回首)
看板Biotech
标题Re: [求救] cleavage site跟transmembrane domain꘠…
时间Wed Aug 18 00:28:22 2010
※ 引述《championelmo (elmo轩)》之铭言：
: 我现在要选PCR的目标
: 全长385 aa 前端有 transmembrane domain和cleavage site
: cleavage site长度比较长 transmembrane domain也包在里面了
: 一般好像都会把transmembrane domain去掉
: 我想请问cleavage site的功能作用是??
: 请大家给我个建议应该要切那个?
cleavage site包含transmembrane domain?
看主内容叙述很难明白你想着手的目的
但你的推文又说 要将PCR product做cloning
所以我猜你应该是要夹出某段DNA序列做cloning
如果是如我所推测
那麽应该要先设计前後两端的primer利用PCR夹出target sequence
然後纯化PCR product，再做TOPOIV ligation和transformation
最後才抽DNA
cleavage site通常是for enzyme辨识的位置
简单来说
如果有一peptide是ABCDEFG，被enzyme切开来後会变成AB+CDEFG或AB+CD+EFG等等
被切开的位置和数量决定於DNA序列上有多少该enzyme可以辨识的位置
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