作者boblu (六百)
看板Biotech
标题Re: [求救] cloning
时间Tue Aug 17 23:28:41 2010
1. 那个 "杂band" 有没有可能就是你的 plasmid 本身？
2. 是否你的 primer pair 也会黏到空 vector PCR？
甚至不需要两个 parimer 都会黏 vector.
只有其中一个 primer 可以黏上 vector, 也就足够产生另一个 PCR product 了
建议：
1. 增加 annealing temp 看看
2. 用空 vector PCR 看看
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 131.212.202.90
1F：推 yaliu:2的说法怪怪的喔～一个primer如果只黏一个地方的话 08/18 23:56
2F：→ yaliu:应该无法大量放大吧～有也可能是一个cycle多一条单股DNA? 08/18 23:58
3F：→ boblu:另一端黏在（预期中的）insert上啊 08/19 03:54
4F：推 yaliu:对後～忘记还有insert 08/19 23:56