作者conan11 (民国的福尔摩斯)
看板Biotech
标题Re: [求救] western疑问
时间Thu Jun 17 01:14:32 2010
※ 引述《chung1987 (免费聊天 请进...)》之铭言：
: ※ 引述《chung1987 (免费聊天 请进...)》之铭言：
: 还有一个问题想问问各位
: 既然transfer的时间过久
: 蛋白会跑过头
: 如果今天我要定量好几种不同分子量的蛋白
: 在transfer的过程中
: 分子量小的蛋白应该会跑得比大分子量的要快
: 像这样：
: 侧面-->
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: SDS胶 蛋白 PVDF
: 想让大蛋白都跑到膜上，小蛋白就过头了
: 反之小蛋白都在膜上时，大蛋白还没transfer完
: 抓transfer时间也没用，顾此失彼
: 这样定量就不准了
: 也不确定蛋白的流失是依量还是依比例
: 有将所有蛋白留在膜上的方法吗?
在下也有个问题想请教
为什麽跑胶的时候我们固定的是电压(伏特)
而转印的时後却是固定电流(安培)
虽然是目的不同没错 但是到底是因为什麽而需要分别固定电流或电压
可能问的有点模糊 先谢谢板友的解答了
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 58.114.81.132
1F：→ puec2:跑电泳也可以固定电流 06/17 01:29
2F：→ puec2:transfer我都是固定电压 06/17 01:29
3F：→ puec2:所以...没有一定.. 不要把实验室烧掉就好了。 06/17 01:30
4F：→ turtle24:我跑胶是固定电流 转印固定电压 06/17 01:48
5F：推 kg9101266:同楼上 跑胶上0.03A 下0.06A 转印电压15V(2片) 06/17 01:56
6F：推 a001ou:跑胶定电流在跑到最後的时候会因为电阻增加有太热的可能 06/17 04:52
7F：推 yohko86:跑胶-->固定电压(80/130/150 V) 转渍-->固定电流(100mA*N 06/17 09:56
8F：→ mobisrat:跑胶固定电压和固定电流差不多一样 因为电阻不太变动 06/17 12:07
9F：→ mobisrat:转渍固定电流则转渍速率不变 固定电压则转渍速率逐渐变慢 06/17 12:07
10F：推 loham:电阻跟温度有关,温度升高电阻变小,V=IR 06/17 12:58
11F：→ loham:所以要看系统,有些牌子的机器散热没那麽好,或是实验室没习惯 06/17 12:59
12F：→ loham:降温,此外温度也会影响pH值 06/17 13:03
13F：推 a001ou:温度太高胶会有变形的甚至溶掉的可能 然後band就歪七扭八了 06/17 17:10
14F：推 leoblack:这没有一定,像我就跑胶=定电流,转印=定电压(semi-dry) 06/17 22:47
15F：→ conan11:谢谢各位的意见交流 小弟得到很多 06/19 23:32