作者biingru (Worker)
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标题Re: [求救] tricine SDS PAGE
时间Thu May 27 05:51:38 2010
※ 引述《power384 ()》之铭言：
: 想请问一下版上的各位
: 为什麽tricine SDS PAGE它需要分内外两种buffer？
: 有什麽功用在吗？
: 谢谢回答
看来你是要分离大约小於 30 KDa 的蛋白，
若是你用一般 SDS-PAGE 的话，因为从头到尾都是用相同 Running Buffer
电流「几乎」稳定，所以小的蛋白大家都跑得差不多快，分不开。
若是利用 tricine SDS-PAGE，它是利用 Cathode buffer 跟 anthode buffer
我想是你的跑胶系统长得让你觉得是加在「内」或「外」
说是内外buffer并不恰当
这两个buffer 差在一个有加 Tricine 一个没有
还有就是 pH 不一样
这样一来，会造成 fake ionic strength gradient
就会造成电流在 cathode 跟 anthode 附近速度不一样
小的蛋白就可以分得比较开（应该说是超级开，good resolution)
换句话说就是在百分比大约10%的 SDS-PAGE 30KDa 以下根本就是所有的band连在一起
但是用 tricin SDS-PAGE 的话，可以分得很开
若是你要的蛋白是 high hydrophobic，用tricin SDS-PAE 更棒
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 141.225.147.116
1F：推 leoblack:ironic?应该是手误~是ionic吧?! 05/27 09:16
2F：→ biingru:对不起 手残 手残 05/27 10:34
※ 编辑: biingru 来自: 68.18.194.4 (05/27 10:34)
3F：推 leoblack:我也不好意思~meeting slide被老板刁久了~就职业病了(默) 05/27 10:51
4F：→ turtle24:10%我能分开30kD跟25kD 差不多小於15kD才会黏在一起 05/27 11:30
5F：→ biingru:如果你有15 18 20 25KDa 你跑 t-SDS 你就知道什麽是爽 05/27 14:18
6F：→ biingru:分得超开，比 standard marker 还清楚 05/27 14:19
7F：推 jck0406:专业喔，从哪里看来的?? 06/04 16:11