作者tina3q (Tina)
看板Biotech
标题[求救] 基本的萤光实验问题...
时间Wed May 26 21:53:45 2010
我们这次的生技实验 流程如下:
1. 将 quinine 和 unknown drug 加入 well 中反应 2~3 hr (图示如下)
每组4个 well → ○ ○ ○ ○
con. 1μl 5μl 1μl
quinine quinine unknown
2. 弃上清液 → PBS 0.5 ml wash 2次 → 4% 0.2 ml KFA fixation 10 min.
我们做的步骤到这结束，其他是助教帮忙做的
3. 萤光显微镜观察 PI 和 GFP.
我的问题是
→ quinine 浓度和萤光有什麽关系？
(我查到的资料是呈正比，但为什麽？ 是无限正比吗？)
→ photobleaching 是什麽？要如何避免对萤光观察的影响？
→ 老师之前的实验用到一个叫Gene Jammer的东西，那是什麽？ (查不到)
Gene Jammer和血清又有什麽关系呢？ (因为那时用不含血清的plate)
不好意思 问题很多! 我还是初学者 请大家多多包涵! 谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.15.178.26
1F：推 leoblack:Gene jammer是一种transfection reagen,号称毒性低 05/26 22:23
2F：→ leoblack:photobleaching就是激发能量过强,造成放不出萤光(能量都 05/26 22:24
3F：→ leoblack:耗尽了,要经过一段时间,让电子恢复後,才能再度激光) 05/26 22:25
4F：→ chaunen:photobleaching.... 感觉雷射要很强... 05/26 22:37
※ 编辑: tina3q 来自: 163.15.178.26 (05/26 22:39)
5F：推 tsubasawolfy:culture room那台要照到GFP photobleach大概要摆个 05/26 22:40
6F：→ tsubasawolfy:2.3小时以上 还有你应该要去问邱老师GFP代表甚麽蛋白 05/26 22:41
7F：→ tsubasawolfy:该蛋白在整个实验中的意义 而不是片断的撷取後上来问 05/26 22:41
8F：→ tina3q:喔喔! 现在整个东西都还很乱跟同学讨论答案也都不太相同 05/26 22:49
9F：→ tina3q:我会去问清楚的 感谢 :D 05/26 22:49