作者DJHINN (dj)
看板Biotech
标题[求救]关於 长片段的TA-cloning
时间Sat May 22 02:35:31 2010
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
我要将 差不多 6.3k的 PCR product insert 入 3.6 K的 TA vector
但是 频频失败
目前用过的 莫耳比为
6.3K product : 3.6K vector = 1:3
我是将 vector 当作 insert看待
因为 product>>>>> vector
但是 仍是失败
有学姊是比较反其道而行
他的比例是
6K product : 3K vector = 8 : 1 (接下来会试看看)
做出来了， 可是我不知道 其理论是甚麽!?
请有做过类似实验的大大 给个帮助一下 ~"~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 59.121.1.64
1F：推 TOTO:把大的insert当作vector，特殊的insert可以换一下cell看看 05/22 03:47
2F：推 bluecsky:因为你合起来大概快10k 有时候比较大要一点运气 05/22 05:05
3F：→ bluecsky:可以尝试heat shock时间拉长跟recovery时间拉长 05/22 05:06
4F：推 leoblack:推1F,不要被名称给局限了,谁比较长,谁就当vector 05/22 08:09
5F：推 jabari:primer放切位直接用ligase会不会比较快 05/22 12:14
6F：→ DJHINN:感谢解答 值得玩味 再试看看 05/22 13:36