不好意思，我说得有点不清不楚 PET system 是一个很棒的蛋白表达系统，只是 BL21(DE3) 让我不爽而已。 若是可能的话，换个 Host 看看，不过前题是可以让 PET 可以相容 可以跟厂商要 PET 的 Full Catalog (不是 plasmid only) 後面附录的地方就有 host 资料。 我的作法您可以参考看看（host was BL21(DE3))： 假设 transformation 成功 我会准备一个 ampicillin plate 和 ampicillin broth， 挑一个 colony 在盘子上划开，然後再到 broth 里喇一喇 第二天，抽 plasmd，定序。若是有 in frame 表示这个 colony 是我要的 就可以从新长出来的盘子挑出来接续你要做的表达实验并可以做短期储存 定序剩下来的 plasmid 就可以存起来 或是把它放入 JM101 or JM109 作成 bacterial glycerol stock 放入 -80度c 这样就有double stocks 这不是最好的方法但是对我有效，您可以参考看看。 --

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