作者ksn (洛)
看板Biotech
标题Re: [求救] Transfomation做不出来><
时间Thu Apr 22 00:49:02 2010
实验室其他人是否有使用上述protocol 以BL21&Rosatta 转型成功??
若没有:
1.确定BL21 及 Rosatta 42度C heat shock 所需的准确时间(每株competent cell
各不相同，自行制备与商业贩售也有差异)
2.是否需要额外条件?@ @ (这边是附加的，看到stratagene贩售的BL21 转型时会
加2-ME，相当精采XD)
若有:
确定plasmid 是否乾净。浓度可降低，通常总量10 ng ~ 50 ng /100 ul competent cell
已经足够，有些trouble shooting 认为浓度太高会影响转型效率。
祝顺利!!
顺便看到Rosatta 可以使用E coli 较少使用的tRNA codon来生产真核生物蛋白
也学习了不少以前没注意过的东西XDDD
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