作者yae (yae)
看板Biotech
标题[求救] 测酵素活性时的buffer使用浓度
时间Wed Apr 14 19:20:20 2010
请问大家~在做酵素活性测试时会使用多少浓度的buffer呢?
我用50mM(total体积100ul)(这是参照paper的浓度)
老师觉得浓度不需要这麽浓~
叫我用5~10mM就好
虽然buffer只是用来稳定反应环境的pH
但5mM会不会太稀了呢?(5mM是现在使用的浓度)
所以想问问大家使用的浓度是多少呢?
谢谢
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◆ From: 140.121.200.192
1F：推 ko363630:感觉50mM太浓了 04/14 21:47
2F：推 raxjimmy:看你的酵素会不会受到离子浓度影响 还有酵素的sample本身 04/15 08:51
3F：推 raxjimmy:buffer浓度和pH值都是什麽状况 酵素通常保存在 stable的 04/15 08:53
4F：推 raxjimmy:pH值环境 但是测活性的时候不一定会用同一个pH 如果不同 04/15 08:54
5F：推 raxjimmy:的话浓一点也还好吧 我是配50mM溶受质在用 04/15 08:56
6F：→ yae:我的酵素是保存在pH7的20mMTris-HCl中，但用一样浓度的Tris去 04/15 19:29
7F：→ yae:OD值很不稳定，所以换了25mM MOPS+MES去测，值布会乱跳，但又 04/15 19:31
8F：→ yae:觉得浓度会部会低的好像有加跟没加依样~ 04/15 19:35
9F：→ yae:对了我说的25mM MOPS是stork 04/15 19:36
10F：推 raxjimmy:只要你的反应pH不会因为其他添加物而改变 buffer浓度就OK 04/17 20:13