作者valentine7 (喷喷猫)
看板Biotech
标题[求救] 想问一下IHC的二抗与blocking serum
时间Tue Mar 30 19:13:21 2010
我在Current Protocols in Neuroscience上
研读IHC时
看到有句话这麽写:
Nonspecific sites are preblocked with normal animal serum (NAS)
from the species in whick the secondary antibody was made.
意思是说
二抗跟normal animal serum要用同一个物种来源
我不懂为什麽得同一种
有问过其他前辈
有些人说没听说过 也没有特别这样用
也查不到为什麽
以上是小妹的第一个问题
另外
有到其他系所看别人作free floating(一种IHC的方法)
他们当时用脱脂奶粉作blocking
一抗是: rabbit anti-mice
二抗是: goat anti-rabbit
我当时不知道IHC也可以用脱脂奶粉blocking
於是请教他
甚麽样的情况下可以不用NAS 而用脱脂奶粉
但他回答不上来
我自己也是查不到答案
以上是第二个问题
先谢谢大家回答喔!!!
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.96.249
※ 编辑: valentine7 来自: 140.112.96.249 (03/30 19:14)
1F：推 kotenka:因为同物种的serum里面不会有被从同物种制造的二抗辨认的 03/30 19:29
2F：→ kotenka:antigen，不容易有non-specific binding。第二个问题的话 03/30 19:30
3F：→ kotenka:有时候我们没有二抗的血清，也会用fish gelatin取代，所以 03/30 19:31
4F：→ kotenka:我想用奶粉也没关系吧!? 03/30 19:31
5F：→ valentine7:那我看能不能一组加NAS一组加脱脂奶粉 试试看 03/31 13:47