大家好 小弟之後想做的实验是把一个protein的receptor给block掉 我们已经拥有那个receptor的antibody 是学姐遗留 ㄜ 不是 是存留下来的 效价还算蛮高的 因为没有把抗体直接打进去体内过 所以有点不太清楚应该怎麽抓condition 比如做WB 有的抗体1:100 效价高的1:1000似乎都做得出来 但是in vivo 的实验好像就算将抗体1:100稀释都没甚麽效果(听说的) 所以不知道有没有做过类似实验的人可以为我解惑我应该怎麽抓condition 不稀释(原抗体) 1:10 (with PBS) 1:20 1:50 1:100这样几组 合理吗? 我们的protein会造成别的protein向上调控 所以我预备先抓condition 做个简单的RT-PCR 看看被block掉的recepor加上原本的蛋白(ligand)後另一种蛋白的mRNA表达 (如果如预期的话 应该是後面的蛋白没有明显的被upregulate) 阿 说了那麽多 我的意思就是想请有做过in vivo的抗体blocking实验的高手们 抗体应该都按甚麽样的比率去做(大约的范围) 毕竟学姐留下的抗体不多 很珍贵阿~ 打rabbit又是两个月 很浪费时间的>< 谢谢~ --

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