作者boblu (六百)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於定量灰阶的图
时间Fri Mar 26 02:26:03 2010
灰阶影像的定量其实很 tricky
最大问题是讯号强度跟实际浓度通常不是线性相关
因此定量很难作
再加上样本之间的 background 如果有差异 连定性的结果都很可疑
比方说 A 的背景值 10, 讯号值 30; B 的背景值 150 讯号值 170
要说 A B 相同我实在很难接受
作检量线当然是最好的 可是组织染色的东西要拿 "已知量" 来作检量线到底怎麽作啊？
只有在背景值差不多的状况下 勉强可以对差异很大的结果作定性的描述吧
用imageJ作影像定量 通常会选择：
将选取的范围的讯号值加总 或是 选取范围内平均每个画素的讯号值
这两个数字意义各不相同 要用哪个得看个别实验的目的
在imageJ 下的analyze 选单下面选 set measurements
把area, mean gray valu, 还有 integrated density 勾起来
开启你的灰阶档案 黑白反转之
（8 bit 灰阶档案的 000 是黑, 255 是白。
黑白反转就是拿 255 去减每个画素原本的讯号值
得到的数字跟才代表讯号强度）
选取你要测量的区域 按 ctrl + M 就会跳出一个结果数值的视窗噜
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※ 编辑: boblu 来自: 71.10.75.57 (03/26 08:12)
1F：推 knownany:感激不尽~~!!!!! 03/29 10:04
2F：→ boblu:啊 没注意到你原本的是萤光影像 萤光影像不要黑白反转喔 05/26 11:34