作者daniel2806 (Tomorrow is another day)
看板Biotech
标题[求救] JC-1 测定粒线体膜电位实验
时间Wed Mar 24 14:25:32 2010
最近再作贴附型细胞测定粒线体膜电位
我使用的是JC-1染剂
正常粒线体膜电位情形下, 细胞应该呈现同时发绿光和红光
而粒线体膜电位被破坏後, 细胞仅呈现绿光
问题来了
实验步骤如下:
我将细胞seed在12 well overnight後
先加入JC-1染色30 min
再加入cccp 100uM (已知的positive control) 处理30 min
然後把细胞用trypsin-EDTA打下来
使它悬浮後 PBS wash
上flow分析
但是
我的无处理的细胞它的膜电位都呈现被破坏的现象 (有一半仅呈现绿光)
反而加入cccp的组别 粒线体膜电位相对比较高
.....这令我困惑.....
我想是不是trypsin-EDTA会影响细胞的膜电位??
有甚麽办法解决??
拜托了~~广大的乡民!!!!
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◆ From: 140.109.183.131
1F：推 fjubiology:Calcium ion homeostasis 03/24 18:36