作者FDA (GeneTech)
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标题[求救] 为什麽ip myc-tag Ab不会抓到内生性myc
时间Mon Mar 22 18:06:46 2010
如题,想请问大家,myc-tag常常接在重组蛋白两端
当我们将这重组蛋白的plasmid送入人类cell line
在用myc-tag Ab去做ip想看重组蛋白的表现量,以及
其他跟此重组蛋白有关的蛋白质,
那问题是,cell line往往myc就会大量表现
为什麽ip抓到的不是内生性myc而是重组蛋白
不懂
谢谢帮忙
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◆ From: 120.126.49.38
1F：推 aggaci:如果确定有这段序列，那就是被挡住了，常有的事 03/22 19:58
2F：→ aggaci:只是tag常常都接尾巴或头，接中间？第一次看到... 03/22 19:59
3F：→ aggaci:看表现亮直接做WB即可何必用到IP？ 03/22 20:00
4F：推 boblu:没有看到说接中间啊？推测po应该也看跟该蛋白互动的成员? 03/22 22:25
5F：推 aggaci:Orz..看错 03/22 22:40
6F：→ FDA:boblu说的对,我就是要看蛋白质间的互动 03/23 00:23
7F：→ sancra:因为你用来pull down的抗体是anti-tag? 03/23 11:58
8F：→ saviora:因为量差很大 你送进去的会比endogenous多很多 03/23 13:23
9F：→ FDA:是anti-myc,当ip的ab 03/24 09:21