我们说明一下我们学校的作的ALT酵素活性的过程 α-ketoglutarate + L-Alanine ←→ Pyruvate = L-glutamate GPT 再把 pyruvate 拿去和 DNP反应 好了以後再加 NAOH 最後放到elisa reader 用 505nm的光去打 测吸收度 而另外而做标准曲线，让样本可以对照标准，来知道浓度 不过现在我有两个问题...第二个其实是学校的作业，不过我想了两个解法 也没办法证实哪个对错，所以想请教一下各位 Q1. 为什麽 pyruvate 和 DNP 反应後产生 2,4-dinitrophenylhydrazone 後 还要加入 NAOH 再放到elisa reader 呢? Q2. 在标线曲线制作的第一组是用 α-ketoglutarate + L-Alanine + DNP 再加入NAOH 而为什麽放在elisa 下 一样会有吸光值呢? 在实验室作过了实验 DNP α-ketoglutarate 对505nm 的吸光值都很小 所以一定是发生了什麽反应 我的想法 1. 不用透过GPT，上述所说的反应会自已进行，所以就会产生pyruvate来反 应。 2. α-ketoglutarate 会自已和DNP产生反应，产生也会吸引 505nm的物质 在这里我就卡住了...因为也找不到相关的资料，手边也没elisa reader 想请各位给我一点提示，不一定要告诉我答案 有资料可以参考就好了 谢谢各位 --

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