※ 引述《mzac1b (Goodday)》之铭言： : ※ 引述《nipon830 (妮碰)》之铭言： : : 我最近在养脂肪的初代细胞 : : 一开始先从小鼠身上取下副睾脂,在经剪碎後进行之後的步骤 : : 但做了两次後发现都有严重污染的现象, : : 器具溶液都经过灭菌了 : : 且毛皮都扒得很开 : : 请问会是什麽原因呢? : 呵呵 : 这个我也在养说 : 我试养大鼠和人类的 : 但我很少污染 : 至少养个头两三代几乎没污染过 : 其实多喷酒精就没问题了 : 保险一点的话 : 1.剃毛替乾净一点 : 2.多喷酒精喷的非常非常湿 : 3.剪刀夹子要灭菌 : 4.分内外剪, 外剪剪开皮 : 内剪处理内部 : 5.过程中在无菌操作台操作 : 我个人经验 : 是在动物室的实验室内操作 : 不是无菌操作 : 就算不剃毛 : 喷很多酒精一样没事 : 我的剪刀只有一副可是老鼠不只ㄧ只 : 处理完一只喷个酒精擦一擦继续做一样没事 : 培养液的话我就必加抗生素 : 就ㄧ般细胞培养的浓度 : 会不会是你的操作环境不乾净? : 或培养细胞的环境不乾净? 回应最原po的问题 用的buffer是KRPH buffer 会分不清楚是油滴还细胞主要问题出在离心不够完全 污染的问题就如同m大说的一样多用酒精 我这里基本上是把器具泡在酒精里 如果还有任何疑问其实可以去图书馆借 "Method in Molecular Medicine" vol 83 Diabetes Melitus: Methods and Protocol" 我贴的那篇Cell metabolism基本上都是靠这本书的方法做的 -- 谁都可以看得出 我脸上满是寂寞无奈 你却用无情的眼神 放逐我到无穷的思念国度 独自流浪 --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 160.94.47.16