作者DancingQue (DanceHaHaHa)
看板Biotech
标题[求救] 牺牲时灌流与否?福马林固定的时间?
时间Wed Jan 20 23:59:20 2010
请教板上大大
如果要做肝脏,肾脏,肺脏三种器官的石蜡切片,
而检体日後要做western blot,HE染色,免疫组织染色,
这样动物牺牲时需要先用PBS或福马林灌流吗?
我知道灌了福马林,就不能做western blot了。
但不灌流，多余的血液（由其是肝肾）又会影响实验结果！
因此不知如何克服上述问题？
顺道想请问如果要做石蜡切片的免疫组织染色，
检体要泡在10%福马林中固定多久呢？听说泡太久会无法做免疫组织染色！
谢谢！
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◆ From: 218.164.147.192
1F：→ vandia:要不要灌流我没做过不确定,但是肺脏要抽气固定喔(要沉下去) 01/21 11:05
2F：→ vandia:我能想到的是灌iced PBS,灌完快点取组织丢到固定液去.. 01/21 11:06
3F：推 KIKO880:我们家是先灌0.9%NaCl再灌4%PFA，灌过4%PFA之後已经fix了 01/21 17:35
4F：→ KIKO880:所以取样的话就可以慢慢来~然後再泡4%PFA 4度C O/N~隔天 01/21 17:37
5F：→ KIKO880:就切片在IHC，学长说fix太久不能作IHC喔! 01/21 17:38
6F：推 wesby:我都是以七天为期限 超过效果就会不好 01/22 10:39
7F：→ allisa:先灌PBS去除血液再灌PFA固定 取完泡4%PFA不超过2天 01/22 15:18