作者puec2 (^^y)
看板Biotech
标题Re: [求救] clone不出来
时间Tue Jan 19 22:06:17 2010
不知道你成功没有？
我觉得enzyme digestion的问题比较大。
我建议你拿回收的PCR片段去做TA-cloning，先把你要的fragment
和两端的cutting site先clone到TA vector上面，再从做好的clone上面(记得定序)
用BamHI/EcoRI把你要的fragment切下来，
再clone到你要的vector上即可。
顺便问一句，你有记得要在两端的primer上面的cutting site旁边多加几个mer吗？
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 211.76.175.170
1F：推 jck0406:我在跑gradient，不过怪怪的，band都很多... 01/19 22:18
2F：→ jck0406:我们有在cutting site+3个mer 01/19 22:18
3F：→ jck0406:不过我们实验室没有TA vector耶~"~ 01/19 22:19