作者littlelizard (专注)
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标题[求救] 目标蛋白无法以Pichia异源表现
时间Wed Dec 30 17:16:31 2009
大家好
最近在做异源表现的实验
使用的是 Pichia 表现系统
表现的是我们实验室发现的免疫调节蛋白 分子量约 13 kD
之前的学姊用 Pichia pastoris KM71 表现的时候就遇到无法表现的问题
目前我试过 Pichia angusta (Hansenula polymorpha) 和 P.pastoris KM71H
两种 host 也都无法顺利表现 = =
因为类似的蛋白做过很多 也都可以成功表现
所以我想应该不是诱导不成功的问题 (我用1% MeOH 诱导)
目前推测可能是 codon usage 的问题
但我比对了一下 并没有连续低於10%的 codon
甚至其实都是很高 %
实在是不知道还有什麽原因造成无法表现 = =
只好来请问各位前辈有没有类似的经验?
以及可能的原因?
谢谢
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