作者blueashin (tRoMboNe pLaYer)
看板Biotech
标题[求救] RNA浓度太高 会引响RT效率吗?
时间Sat Dec 19 18:08:17 2009
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
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想要请教板上的各位先进
我使用的是 promega的AMV reverse transcriptase
之前使用上没有问题
但是这一次不知道为什麽 转完RT之後
只能放出18SrRNA的片段
却没办法放出目标基因
这组primer基本上已经用过很多次了 原则上不会有问题
仔细一想 唯一有问题的地方似乎就是 RNA浓度有点高
2046ng/ul
我总共用了10ul也就是20460ng 然後只加1ul的AMV不知道
有没有人碰过类似的问题~
感激不尽
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 210.241.123.131
1F：→ NKTcell:建议可以先看看RTase的说明书~ 12/19 18:29
2F：→ jazzdevil:RT之前不是应该知道RNA浓度 再定量去转吗 12/20 00:38
3F：推 singren:2046还好吧..20460就有点高了... 01/05 12:34
4F：→ singren:primer是random还是target primer 还是oligo dT? 01/05 12:36
5F：→ chaunen:2ug刚好 01/12 21:59