先说一下实验目的: 是要看我做的mAb会不会认immunogen 因为效果一直没有很好~连positive control的抗体都没有移出来 所以现在要先确定control组的抗体 以及我们的方法跟操作上有没有问题 我是使用感染A virus 的细胞 然後用 anti-A virus 的 mAb去当一抗 二抗是用goat-anti mouse FITC (也有用过Alex Flour 488) 我的negative control 是用没有感染的细胞~染一样的一抗二抗 可是做出来的结果 两种细胞是差不多的 甚至感染後的pick 比正常细胞还往内 我做过很多次了 也有试过用电穿孔方式把病毒plasmid 送到细胞内 再拿去跑 结果也一样 = = 然後我们想说~ 会不会这个抗体辨认细胞本来就是比较不ok (但它做ELISA跟western 都很ok) 那如果不要用细胞~ 用protein G先把抗体抓下来 detector 用 A virus ~然後一抗~二抗 这样会不会效果好一点 可是我找了很多paper 都还没看到有人用protein G去跑 flow 再来我也很担心~ protein G 那麽大~会不会把flow的管子塞住 想请问有没有人有做过相关的实验?可以给我点建议吗 谢谢 --

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