1. 曾经打过10K的都OK，所以7.5应该是没问题 2. 能表现萤光蛋白表示应该plasmid的时候是正常的 3. 不知道您注射经验有多久?40个里面只有1.2个表现，表示有可能您没打好.. 可能跑到水里去了，没有进细胞或卵黄囊 4. 线性化的过程，是不是有问题?是否切到萤光蛋白?或是切到promoter和萤光蛋白中间? 5. 24小时应该表现还是很强的时候，没那麽快degrade.. 以上，仅供参考.. ※ 引述《chisarah (莎拉小姐)》之铭言： : 近来我要把一个大约7500bps的plasmid 放进斑马鱼的胚胎中表现 : 首先我linearize了那个plasmid (大概7500bps) : purify了之後就与纯水和phenol red 混合在一起 : 把混合物打进斑马鱼的胚胎中 : 24小时後在显微镜下观察萤光蛋白的表现情况 : 可是我做了几次都没有什麽东西表示出来 : 反而有一次直接把plasmid打进斑马鱼的胚胎中, 40个胚胎宥1, 2个表现了那个萤光蛋白 : 可是那个萤光是很弱的 : 是不是我用错了restriction enzyme 去linearlize那个plasmid呢? : 还是因为那个linearized plasmid 太长而在鱼中degrade了呢? : 有没有人知道microinjection最多可打多大size的plasmid呢? : 谢谢各位的解答!!! --

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