※ 引述《anchi (我家有只可爱小都)》之铭言： : 请问,使用lipofectamine做transfection : 和用virus infection, 结果有何不同呢? : 以下是我对此二方法的想法:(可能有很多错误请大家帮我指正) : 假设我要将一个基因送入细胞株让他表现. : 一般可选择可在真核细胞表现的vector(ex:pcDNA3)或 : virus vector(ex:retrovirus vector)来携带此基因. : 假设用pcDNA3携带此基因,再用lipofectamine送入细胞, : 经过抗生素筛选一段时间,可得stable cell line. : 如此可将此珠细胞冷冻保存,每次实验需要再取出培养. : 假设用virus vector携带此基因,则需先送入packaging cell, : 制造virus, 再去infection 目标cell. : 而被感染的细胞虽然会表现此基因,但细胞被病毒感染不久後也会死亡. : 似乎无法稳定保存. retrovirus 有个特性你忘记罗 去查查看 这样你就会知道用virus infection的方式是可以稳定保存的 且花费的时间比用一般vector送进去挑stable clone来的短 所以不用再从package开始 : 每次需要此细胞时须从vector送入packaging cell步骤开始... : (好像没看过直接用lipofectamine直接把virus plasmid送进目标细胞株,why?) : 这样看起来好像使用一般真核细胞表现vector的方法比较简单也比较能保存. : 但是virus infection却也是实验是很普遍的方法. : 请问大家这两种方法transfection的结果差异或优缺点在哪里呢? episome: 简单快速方便，一般P1 lab就可操作。缺点是不同cell line transfection efficiency 会有很大差异，像一些难搞的cell line (ex:HepG2)就算用万恶的(价格上) lipofectamine2000 效率也不大好 virus infection: 需要P2 lab才能操作(除非你偷做)，优点就是efficiency极好(MOI可以控制)，个人 推荐XD，至於你问的why那个问题，你去翻翻拿来做virus的plasmid里面的map就知道 原因 欢迎大家分享心得和补完 : 不好意思若我有些观念错误请大家帮忙指正,谢谢! : :) : ※ 编辑: anchi 来自: 125.231.224.69 (11/13 20:00) --

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