作者anchi (我家有只可爱小都)
看板Biotech
标题[求救] 请问关於transfection
时间Fri Nov 13 19:58:26 2009
请问,使用lipofectamine做transfection
和用virus infection, 结果有何不同呢?
以下是我对此二方法的想法:(可能有很多错误请大家帮我指正)
假设我要将一个基因送入细胞株让他表现.
一般可选择可在真核细胞表现的vector(ex:pcDNA3)或
virus vector(ex:retrovirus vector)来携带此基因.
假设用pcDNA3携带此基因,再用lipofectamine送入细胞,
经过抗生素筛选一段时间,可得stable cell line.
如此可将此珠细胞冷冻保存,每次实验需要再取出培养.
假设用virus vector携带此基因,则需先送入packaging cell,
制造virus, 再去infection 目标cell.
而被感染的细胞虽然会表现此基因,但细胞被病毒感染不久後也会死亡.
似乎无法稳定保存.
每次需要此细胞时须从vector送入packaging cell步骤开始...
(好像没看过直接用lipofectamine直接把virus plasmid送进目标细胞株,why?)
这样看起来好像使用一般真核细胞表现vector的方法比较简单也比较能保存.
但是virus infection却也是实验是很普遍的方法.
请问大家这两种方法transfection的结果差异或优缺点在哪里呢?
不好意思若我有些观念错误请大家帮忙指正,谢谢!
:)
※ 编辑: anchi 来自: 125.231.224.69 (11/13 20:00)