作者penlinda (pen)
看板Biotech
标题[求救]毛细管电泳的问题
时间Mon Nov 9 17:45:57 2009
我们实验室原本是作药物分析,近期想试着使用CE 分离DNA片段
我尝试重覆他人paper, 但是无法成功
想请问是否有人有跑DNA的经验
(我是兽医背景,对化学和分生超级不熟啦)
我尝试的条件如下
CE: Beckman P/ACE MDQ
Detector: 254 nm UV
Capillary: 75 um ID, uncoated fused-silica capillary, 20 cm to the detector
New condition: 1 mg/ml CTAB, 1 h
Pre-rinse: 0.5 % PEO (Mr=600000) in 100 mM TB, containing 0.36 ug/ml CTAB and 25 ug/ml EtBr ; inj. by pressure (20psi), 5 min
Sample: DNA marker (100-3000 bp); inj. by voltage (-1 kv), 12 sec
Separation: -11 kv (reverse voltage), 20 min
Rinse between runs: 0.5 M NaOH, 10 min, 20 psi; water 2 min, psi
谢谢指教
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.120.114.220
1F：推 silverberry:为什麽一定要用毛细管电泳啊? 看你的 marker 11/09 20:54
2F：→ silverberry:用一般的 agarose 电泳跑 也会挺漂亮的呀? 11/09 20:54
3F：→ penlinda:我是想至少marker要先跑出来 再考虑分离大小相近PCR 产物 11/09 21:47