作者coolmeow (谁能爱我100趴)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问NHS EDC的用途及溶剂
时间Sun Nov 8 20:58:55 2009
非常感谢cc神大的解答
但在下真的非常才疏学浅孤陋寡闻
对於cc大的解释还是有些地方不懂...
※ 引述《ccsu (杰克)》之铭言:
: ※ 引述《coolmeow (谁能爱我100趴)》之铭言:
: : 抱歉在这个版上问这好像很浅....
: : 最近老师要作生物试片以测试实验室自己架的光学机构 如...SPR 但尚无流道
: : 我看了一些paper的步骤 但是实验室实在没有生医基础
: : 所以有一些问题或许很蠢但是请各位包涵
: : 1.请问NHS及EDC的在表面改质的步骤上到底有什麽样的功能或目的?
: : 2.NHS及EDC里面都有CH"火巠"类 这样算是有机物吗? 所以他的溶剂是水还是乙醇呢?
: : 3.我们使用的表面改质SAM是MHDA 有16个c的tail group 一端S 一端COOH基
: : 请问这个东西真的只要"浸泡12小时"就可以接於Au表面吗?
: : 我对於这一点非常怀疑.........(有无需要考滤水温或其他大气压力等因素)
: : 4.我们使用生物分子为BSA 再请问BSA的溶剂"PBS"的成分有没有所谓的标准
: : 因为我们上了SIGMA买的成分是有PB 10mM + NaCl 138mM + KCl2.7mM
: : 编号是P-3813 但是参考其他硕论或是paper 不是没有详细交代其过程成分
: : 就是写的太专业看不懂....囧. 所以我们先姑且买了这个来用
: : 5.请问加入BSA时的PBS有没有需要顾虑水温或灭菌 有些paper好像说要体温(37度)
: : 但有些又没有交代.....
: : 6.有许多文章有提及tween啥的.... 请问这倒底是在干嘛的呢
: : 主要功能是......?
: : 抱歉一下子问了一堆问题
: : 拜托来个神人帮我解答吧 (跪求...)
: 好久没有做实验了,凭久远的记忆试着帮你解答一下,如果有误请大家鞭小力一点..
: 1.EDC和NHS是活化COOH基用的,EDC先和COOH基反应,然後再由NHS和这个基团反应,
: 最後变成 R-C=O -NHS的反应基团,接下来就可以和带有 R2-NH2的基团反应,变更
: 稳定的 R-C=O -NH -R2 键结
:
请问R2的2下标吗 = =? R2是指什麽呢?
我只知道R在有机化学里可以代替火巠类或烷类但其实不知其真正的意思
请cc大将在下的程度自动归类到高中的基础化学以下....XD
或是哪里有网站有详细资料也请指导一下
: 2.NHS和EDC用水就可以溶解了
: 3.会啊,这就是所谓的Self assembly monolayer,可以去google一下相关原理,不过
: 如果我没记错,成不成功和水温和压力的因素不大,和碳链的长短和浸泡时间关系
: 比较大...
: 4.PBS就是phosphorate buffer saline,要选哪一种基本上和你未来的实验设计比较
: 有关吧...
:
在下只是需要一些试片来测试一部很阳春的SPR是否可以scan到反射角度位移
的功能而已 所以当BSA接上Au後 化学反应的部份就是到这里完成了
接下就是量测部分
所以目前的实验设计简约来说 就是要将MHDA接到Au上 再将BSA接到COOH基上..
: 5.同4,和你实验设计比较有关,不然随便加一加也会溶解
: 6.Tween是一种介面活性剂,他是商品名,依照不同的特性有Tween-20,Tween-80...等
: 很多种类,主要是避免非特异性吸附用的...
请问什麽是"非特异性吸附"......囧
希望对您有帮助,如果有误也请其他神人补充改正一下...
抱歉又丢了一堆问题出来
请cc大不厌麻烦的再帮我解释一次
(叩恩)
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◆ From: 140.127.114.165
1F:→ turtle24:R2就只是指另外一个反应物而已 R1+R2->R1-R2 11/08 21:13