※ 引述《coolmeow (谁能爱我100趴)》之铭言： : 抱歉在这个版上问这好像很浅.... : 最近老师要作生物试片以测试实验室自己架的光学机构 如...SPR 但尚无流道 : 我看了一些paper的步骤 但是实验室实在没有生医基础 : 所以有一些问题或许很蠢但是请各位包涵 : 1.请问NHS及EDC的在表面改质的步骤上到底有什麽样的功能或目的? : 2.NHS及EDC里面都有CH"火巠"类 这样算是有机物吗? 所以他的溶剂是水还是乙醇呢? : 3.我们使用的表面改质SAM是MHDA 有16个c的tail group 一端S 一端COOH基 : 请问这个东西真的只要"浸泡12小时"就可以接於Au表面吗? : 我对於这一点非常怀疑.........(有无需要考滤水温或其他大气压力等因素) : 4.我们使用生物分子为BSA 再请问BSA的溶剂"PBS"的成分有没有所谓的标准 : 因为我们上了SIGMA买的成分是有PB 10mM + NaCl 138mM + KCl2.7mM : 编号是P-3813 但是参考其他硕论或是paper 不是没有详细交代其过程成分 : 就是写的太专业看不懂....囧. 所以我们先姑且买了这个来用 : 5.请问加入BSA时的PBS有没有需要顾虑水温或灭菌 有些paper好像说要体温(37度) : 但有些又没有交代..... : 6.有许多文章有提及tween啥的.... 请问这倒底是在干嘛的呢 : 主要功能是......? : 抱歉一下子问了一堆问题 : 拜托来个神人帮我解答吧 (跪求...) 好久没有做实验了，凭久远的记忆试着帮你解答一下，如果有误请大家鞭小力一点.. 1.EDC和NHS是活化COOH基用的，EDC先和COOH基反应，然後再由NHS和这个基团反应， 最後变成 R-C=O -NHS的反应基团，接下来就可以和带有 R2-NH2的基团反应，变更 稳定的 R-C=O -NH -R2 键结 2.NHS和EDC用水就可以溶解了 3.会啊，这就是所谓的Self assembly monolayer，可以去google一下相关原理，不过 如果我没记错，成不成功和水温和压力的因素不大，和碳链的长短和浸泡时间关系 比较大... 4.PBS就是phosphorate buffer saline，要选哪一种基本上和你未来的实验设计比较 有关吧... 5.同4，和你实验设计比较有关，不然随便加一加也会溶解 6.Tween是一种介面活性剂，他是商品名，依照不同的特性有Tween-20，Tween-80...等 很多种类，主要是避免非特异性吸附用的... 希望对您有帮助，如果有误也请其他神人补充改正一下... --

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