作者june0101 (JUNE)
看板Biotech
标题[讨论] 请教蛋白质denature的问题
时间Sun Nov 1 20:12:18 2009
请问大家
为何跑SDS PAGE时 要把protein denature呢
不了解将双硫键打断的目的是什麽??
然後 protein sample buffer 中的还原剂
用 DTT 配制是否有该注意的保存问题呢?
我知道 DTT 的还原力很强 然而他本身却也不太稳定
冷冻在 -20 冰箱几个月後却变色了 (从蓝色变成黄色)
査了一些资料是说 DTT 在 PH7 时才发挥作用
那我的 sample buffer 是否也不能用了呢?
因为不想一直重配 想厘清其中的疑点
还请有经验的前辈指教 谢谢~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.240.87.178
1F：推 PAGBR:打断双硫键让分子变小 11/01 23:06
2F：→ yuasa:得先破坏蛋白质的三四级结构，否则在胶体内游动的速率会受到 11/01 23:35
3F：→ yuasa:影响 11/01 23:35
4F：→ seanbest:我也觉得是把结构破坏，让所有的蛋白质在相同状态起跑 11/01 23:46
5F：推 tsubasawolfy:SDS要完整包覆才可以代表这蛋白的大小-带电量关系 11/02 00:11
6F：→ tsubasawolfy:另外DTT应该是透明的吧?(结冻是白色) 你的蓝变黄 11/02 00:12
7F：→ tsubasawolfy:是加在sample buffer里面了? 不嫌麻烦可以要用时再加 11/02 00:13