作者BuSmall (Bu)
看板Biotech
标题[求救] western
时间Wed Oct 21 20:53:58 2009
最近跑western用了一支新的抗体
sample分别是cell lysate和从tissue抽出来的protein
压片完发现cell lysate的band和tissue的band差了大概20 KDa
正常来说不是应该要一样吗?
请问有人遇到这问题过吗?
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 163.25.118.178
1F：推 tsubasawolfy:找PAPER看看你的蛋白有没有PTM? 10/21 20:56
2F：→ tsubasawolfy:没有的话做IP後打MASS 如果两个是同样的话...应该就 10/21 20:57
3F：→ tsubasawolfy:不用担心毕业问题了? 10/21 20:57
4F：推 xenosdk:请去swissport确认一下alternative splicing 10/21 21:14
5F：→ BuSmall:PTM在cell和在tissue会不一样吗? 10/21 21:20
6F：→ Anvec:PTM应该不会差那麽多吧 @.@a 20kDa ? 10/21 23:14
7F：→ rimeni:SUMO就是差20kD 10/22 01:15
8F：推 reinherd:你原先的protein mw多少 我之前遇到过差一倍 刚好是dimer 10/22 03:16
9F：→ reinherd:会不会你的ab specificity不够 抓到其他蛋白质 10/22 03:17
10F：→ reinherd:有没有multiple band, 还是只是单一band? 10/22 03:17
11F：→ reinherd:我建议你找你老板讨论 或是把照片上传上来 ps 这年头还有 10/22 03:18
12F：→ reinherd:人在压片阿～～＠＠ ? 10/22 03:18
13F：推 xenosdk:我也还在压 实验室里有gel doc可是没有人喜欢用 10/22 08:56
14F：→ chvkimo:底片压的sensitivity 比较高阿 机器照的background会偏高 10/22 11:46
15F：→ chvkimo:各有利弊 10/22 11:47