※ 引述《terrylin17 (快意)》之铭言： : 请问各位大大 : 我目前实验主轴是 SiRNA的transdection 作 基因knockdown的实验 : 使用的辅助剂是用 invitrogen买的 lipofatamine2000 : 条件基本上是抓 : 5 ul lipo + 2.5 ul SiRNA 这段话基本跟没说一样 你是在什麽plate上做的 是6-wll plate还是12 ,24, 96 或是你在dish做的? 你要说lipofectamine占的%比较有意义 另外2.5uL siRNA的什麽样的浓度的stock 你要说siRNA的final conc.是多少nM才比较有意义 : transfection 6hr後再加入30%FBS medium : 我是做cell culture 的 SiRNA knockdown : 但是knockdown的效果并不是很稳定..... 你是说你每次transfection完都做western或qPCR 然後Knock down的程度都不同吗 : 但是我又不能再换其他种的transfect方法 : 请问有人也有做过类似的实验吗 ? : 请教各位了 谢谢 我对lipofectamine有点感冒 你可以试试Dharmacon的HiPerfect reagent 他总共有四种 网站上的manuel有适合的Cell line的资料 你可以试试 我之前对某一种rat 的beta-cell line做transfection Dharmacon的可以多knock down 20% (同一个siRNA) --

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