作者sonix (嘿嘿)
看板Biotech
标题[求救] Western blot的band会断裂
时间Thu Sep 3 22:58:45 2009
先附上图，
http://www.flickr.com/photos/8163301@N06/3884552424/
我是用BioRad的湿式mini-transfer系统，
电流是350-400mA，一个半小时，band的位置大概是34kDa，
令我纳闷的是band断裂(圈起来的地方)的情形不是每次都有（比例算高的），
这是因为有气泡的关系吗？
压完片的membrane用CBR染色的确有些部分band都消失或扭曲了，
可是我已经将membrane和gel间的气泡都赶走了，
海绵和滤纸那边的气泡说真的也看不出来，
另外常常在transfer完後，membrane会变的有点透明（有蛋白质轨迹的地方），
这样正常吗？是不是membrane该换了呢？
麻烦高手解答一下，谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.165.129.144
1F：→ qbobo:改成一片100mA,4度C,overnight;或是200mA,4度C,2hr~2.5hr 09/05 21:33
2F：→ qbobo:同样的跑两片的话,就把电流double 09/05 21:34
3F：→ sonix:所以这是因为温度太高的关系？两片电流需要加倍吗？看来是 09/05 23:38
4F：→ sonix:串联啊 09/05 23:38