作者vegefruit ()
看板Biotech
标题[求救] 大片SDS
时间Thu Sep 3 15:12:38 2009
发问时请注意，若是要问实验相关的问题，请将实验的步骤、所用的条件大致列出
以方便板友帮您追踪问题
----请将上列注意事项以 ctrl + k 删除後开始编辑文章----
最近开始跑大片的SDS(BIO-RAD 16*18 thickness0.75mm)
STACKING GEL 12 % pH8.8
RUNNING GEL 4.5 % pH6.8
固定电压(刚开始电压120时电流只有30几，後来电压调到200但跑到後来电流会只剩10几甚至个位数)
整个跑完要11个小时..这样正常吗?
而且SAMPLE 没办法形成漂亮的BAND
ECL做出来会发现sample diffusion变成模糊的一团
该怎麽解决diffusion的问题?
MARKER也是且很模糊(15microgram)
但跑的时候TRACKING DYE是有压成细细一条
running buffer ph8.3
(1X=25mM Tris, 192mM glycine ,0.1% SDS)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.136.180.140
1F：推 leoblack:stacking12%,running 4.5%?!写反了?!gradient PAGE?! 09/03 15:22
2F：→ leoblack:跑大片胶有没有用冰降温or在冷房跑?! 09/03 15:23
3F：→ vegefruit:写反了XD 有在4度C冷房跑且有加搅拌子 09/03 15:53
4F：→ vegefruit:不是gradient gel 09/03 15:56
5F：→ greenmoon00:大片胶跑O/N是常有的事吧? 09/04 02:25
6F：推 Seal13:以前我老板是用低伏特跑over night.. 09/07 10:07