我最近再做RACE 因为想看两个基因的translocation 其中有一个positive control (A基因+B基因 都是已知的了) 我用的是invitrogen generacer 但是很奇怪的是 我clone完之後定序 80%都是wild type(只有A基因) 但是当我用设计primer在A和B去做普通的PCR 是可以得到漂亮的band 这个positive control是cell line 照里说应该是一半是wild type一半有translocation 当然做完2 step RT-PCR的时後 只有得到一条band 学姐说应该要得到至少两条才对 (一条正常 一条translocation 可能还有一些non-specific) 不知道要怎麽改善PCR条件 尝试降低annealing temperature 还有其他方法吗 谢谢! --

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