作者biogene (鸟蛋)
看板Biotech
标题[求救]GST fusion protein的纯化
时间Fri Jul 24 00:57:11 2009
小弟我这几个月来都在做GST fusion protein的纯化
这个protein能够成功的被induction出来
但是elute的出来的东西真的很少
想问问各位还能够从哪些方面改善?
目前elution buffer的条件:
30mM reduced glutathione
100mM pH=8.5 Tris-HCl
200mM NaCl
1% Triton-X-100
就目前而言 这条件是最好的
--
另外protein从一开始都是溶在PBS+1% Tween-20
最近在想是不是这个buffer不适合
还有当GST後面接上一个protein
elute的条件需要更动是受哪些因素影响?
希望大家提供点意见or建议 谢谢:)
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.227.132.178
1F：推 bluecsky:elute的量少 你resin使用量是否过高或过低? 07/25 16:59